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11 1 2025年9月13日 星期六 目录导航 1
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  PCR检测技术:为何能精准“抓住”病毒
 

□徐红

 

   在传染病防控与医学诊断领域,PCR(聚合酶链式反应)检测技术始终占据着举足轻重的地位。无论是隐匿在体内的致病病毒,还是潜伏在环境中的威胁,这项技术都能如同精密的“分子猎手”,在微观世界里精准锁定病毒踪迹。PCR是一种在体外模拟发生于细胞内的DNA(脱氧核糖核酸)快速扩增特定DNA序列的分子生物学技术。DNA是生物细胞内携带遗传信息的一种核酸,由脱氧核苷酸组成双螺旋结构的大分子聚合物,犹如紧密咬合的“生命密码链”。
    PCR检测技术通过精确控制温度变化,将这一复制过程拆解为3个关键步骤:首先,样本被加热至90摄氏度~95摄氏度,双链DNA在高温下解旋成单链,这一过程称为“变性”;随后,温度降至50摄氏度~65摄氏度,人工合成的短链核酸序列——引物,会像“定位器”一样,与单链DNA上的特定区域结合,即“退火”;最后,温度回升到70摄氏度~75摄氏度,DNA聚合酶以单链DNA为模板合成新的DNA链,完成“延伸”。这3个步骤构成一个循环,每循环一次,目标DNA片段的数量便呈指数级增长。经过30次~40次循环后,极微量的DNA也能被扩增数百万倍。
    对于大多数以RNA(核糖核酸)为遗传物质的病毒,如流感病毒、丙肝病毒等,检测时需要借助反转录PCR检测技术。以流感病毒检测为例,检验人员会针对病毒RNA中高度保守且特异性强的基因片段,设计引物与探针。引物能够精准识别并结合目标基因序列,而标记有荧光物质的探针则充当“信号员”。当引物引导DNA聚合酶合成新的DNA链时,探针会被降解,释放出荧光信号。随着PCR反应的持续进行,病毒核酸片段不断扩增,荧光强度也随之增强。仪器捕捉到这一信号,即可判断样本中是否存在病毒核酸。
    PCR检测技术的精准性,源于其精妙的设计与严格的反应控制。引物和探针的特异性是确保检测准确性的关键。
    引物,如同“分子钥匙”,仅能匹配病毒核酸的特定“锁孔”,避免与人体自身DNA或其他微生物核酸发生错配;探针,则通过荧光信号的释放,为检测结果提供双重验证,降低假阳性的风险。此外,PCR反应对温度、时间、试剂浓度等条件的严苛要求,也保障了检测的可靠性。每个反应参数都经过大量实验优化,确保反应在体外环境中稳定进行。
    PCR检测技术的灵敏度,同样令人惊叹。即使样本中仅有少量病毒核酸,经过多轮扩增后也能被精准检测。例如,在乙肝病毒检测中,哪怕血液样本中病毒含量极低,PCR检测技术也能将其核酸片段放大至可检测水平,帮助检测人员及时发现隐匿的感染。同时,严格的标准化操作流程,进一步提升了PCR检测的可信度。从样本采集时的规范操作,到运输保存过程中的冷链管理,再到实验室检测环节的标准化操作,每个步骤都有严格的质量控制标准,减少外界因素干扰。
    总之,PCR检测技术凭借精准、灵敏、快速的特性,已广泛应用于病毒筛查、疾病诊断、生物进化研究等领域。
    (作者供职于山东省潍坊市昌邑市人民医院)

 
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