分子分型就是根据基因和蛋白质在肿瘤细胞里的表达情况，将癌症进行分类。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着妇女的健康。但是，乳腺癌并非一个单一的疾病实体，而是一个异质性极强的疾病群。目前的解剖学分期和组织学分类不能充分体现乳腺癌的分子异质性，导致相同病理类型和临床分期的乳腺癌患者在治疗效果和预后上存在较大差异。结合分子水平和组织学分类来研究乳腺癌的发病机制、治疗策略和预后评估是当前的研究热点，也是实现乳腺癌个体化治疗的关键步骤。模型，为开展乳腺癌的精准治疗奠定基础。

一、乳腺癌的四大分子亚型

根据基因表达谱分析，乳腺癌可大致分为四类主要分子亚型：

Luminal A型乳腺癌发源于腺管上皮细胞，是一类分化较好，低度恶性的肿瘤。肿瘤细胞保留了腺上皮的性质，细胞表面存在雌激素受体。这类肿瘤生长缓慢，不易发生远处转移，预后较好。内分泌治疗是首选方案，如他莫昔芬可以防止雌激素刺激肿瘤生长。

Luminal B型乳腺癌也起源于腺管上皮，与Luminal A类似都有雌激素受体表达。但Luminal B型生长速度更快，转移风险增加，对内分泌治疗敏感性稍差。所以除了内分泌治疗外，还需要联合进行化疗来杀灭癌细胞。总体来说Luminal B型预后优于HER-2阳性和三阴性型。

HER-2型乳腺癌的特点是HER-2基因扩增和过度表达，增殖速度快，属于中高度恶性类型。但HER-2阳性肿瘤对 Targeted therapy非常敏感，如曲妥珠单抗可以明显改善预后。HER-2检测非常关键，明确HER-2状态指导用药。

三阴性乳腺癌不表达ER、PR，也没有HER-2过表达，属于生物学行为最恶性的类型。它缺乏可以针对的治疗靶点，主要依赖化疗。但化疗敏感性也较差，预后最差。新靶点的发现仍是这类患者的急需。

分子分型能让医生更了解肿瘤属性，因材施教。要实现分子分型，就需要各种高科技设备的帮助，比如“基因测序仪”可以读懂所有基因数据，“聚合酶链式反应仪”可以放大目标基因进行检测。未来乳腺癌分类可能会进一步细分为更多亚型，治疗效果也会更佳。分子病理技术让乳腺癌不再是“一锅烩”，而是可以因人制宜的个体化治疗。

二、实现分子分型的技术手段

1.免疫组化技术利用特异性抗原抗体反应的原理，通过标签化的抗体来检测肿瘤组织切片中的重要蛋白质，主要是某些与肿瘤发生发展相关的关键蛋白质的存在及表达量。在乳腺癌的分子分型中，免疫组化主要可以检测雌激素受体、孕激素受体和HER-2等关键蛋白标志物的表达水平。这些标志物的存在与否及表达量的高低，直接关联到乳腺癌的分子亚型及生物学行为。免疫组化操作简便，结果判读直观，是实现乳腺癌精确分子分类的重要技术手段。

2.流式细胞术是一种可以对单个细胞进行多参数检测的技术。在乳腺癌分子分型中，流式细胞术可以通过标记肿瘤细胞表面特异性抗原的荧光抗体，检测悬浮状态下单个乳腺癌细胞表面蛋白标志物的表达，进行全面的免疫表型分析。这有助于发现乳腺癌新分子亚型相关的细胞表面功能蛋白标志物。

3.FISH技术：荧光原位杂交（FISH）可以使用荧光标记的DNA探针检测目标基因的拷贝数变化。对于乳腺癌分型，FISH主要应用于检测HER-2基因拷贝数的扩增情况，因为HER-2基因扩增导致其蛋白过表达是一类重要的乳腺癌亚型。FISH技术可以让我们直接可视化观察到HER-2基因的扩增状态。

4.PCR技术：聚合酶链式反应（PCR）可以大量扩增目标DNA序列，应用于检测已知的致癌驱动基因突变情况，如EGFE、PI3KCA、TP53等基因的突变状态，这些结果也用于确定乳腺癌的分子分类。实时荧光PCR技术操作简便、敏感性高，是实现乳腺癌分子检测的重要工具。

5.基因微阵列：可以检测数万个基因的表达谱，绘制乳腺癌的整体表达特征。

6.二代测序技术：进行全基因组或全外显子组分析，系统检测肿瘤基因组变化。

7.质谱技术：不同的疾病会导致不同的蛋白质表达变化，这些变化可以通过质谱技术检测出来。例如，质谱技术可以用于检测癌症患者的血液或尿液中的肿瘤标志物，这些肿瘤标志物是一些与癌症相关的特异性蛋白质。

（河南省人民医院病理科 牛伟红）